程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究中的成效

反向细胞核( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“混合物活检骨头”，已在前列白血病乳白血病、癌和结直肠癌之中用于高血压评价。小细胞核心脏病(Small celllung cancer，SCLC)组织骨头来源太低，且依赖有效的受控住院重新分配和计算高血压的生物学标志物。持续其发展人类学家CTCs在SCLC之中的药理学应用顺利进行了探险官能深入研究，推测CTCs对SCLC的确诊、再行，受控住院、重新分配，检验、高血压以及建立个体化病人方案等较强极其重要含意，本文就CTCs在SCLC药理学应用之中的深入研究进展应予综述。

一、SCLC病人CTCs的样品方依此有

CTCs的样品方依此有主要有流式细胞核样品新科技产业( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶链反应(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTCCPU(CTC-chip)新科技产业和膜滤过分离细胞核新科技产业(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其之中CellSearch系统因其半自动化的操作SDK，较高的特异官能、敏感官能和可重复官能，成最常应用的CTCs样品方依此有。

早在2004年，Allard等首度应用CelISearch依此样品了99事例心脏病（未所述SCLC事例数）病人的CTCs，随后Nagrath等采行CTC-chip依此样品了55事例心脏病病人外周屑C TCs。2009年以后的深入研究多采行CeIISearch依此样品SCI．C病人外周屑CTCs，然而该方依此有由于对依赖上皮细胞核特点的细胞核会显现出漏检可能，且与免疫反应磁珠及抗体结合的CTCs难以行某些后续的样品，药理学应用受到之外。

持续其发展，随着基体科技产业的其发展，载体CTCs表面标志物的特异官能识别系统分f修饰的基体材料结合纤流控新科技产业的CTCs样品SDK的深入研究受到相当多关注，2013年，《自然》（Nature）杂志将CTCs基体样品选为最具创新官能和转化潜力的确诊新方依此有，科研成果令人瞩目。但就现今来看，现有的CTCs样品方依此有各有利弊，未有深入研究猜测哪种方依此有对SCLC的CTCs样品非常有占有优势。着眼未来，亟须要整合特异官能、敏感官能很低的CTCs样品新科技产业，为SCLC的基础和药理学深入研究带来突破。

二、CTCs在SCLC药理学应用之中的深入研究长期以来

（一）CTCs个数与SCLC的确诊、再行

持续其发展多项深入研究显示CTCs个数高水平与SCLC的确诊、再行有亲密关系0 2009年Tanaka等应用CeIISearch依此样品了1 50事例7.5ml外周屑CTCs，其之中心脏病1 25事例、非恶官能25事例，心脏病病人还包括116事例非小细胞核心脏病(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9事例SCLC。

深入研究表明SCLC病人CTCs阳官能率为66.70-/0（6事例／9事例），突出高于NSCLC病人的CTCs阳官能率(白血病25.9%，鳞癌40.9%；白血病对比SCLC，P

同年，Hou等应用CeIISearch依此样品了50事例初治的SCLC病人外周屑CTCs，还包括20事例之外期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病人和30事例相当多期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病人，时间延迟期ED-SCLC及LD-SCLC病人的之中位CTCs个数都为237和2个/7.5ml屑，7事例未测出CTCs的病人均为LD-SCLC，显然CTCs个数高水平与SCLC再行具体。

相近的结论在2012年被日本人类学家Naito等猜测，人类学家在51事例SCLC病人之中立国用CeIISearch依此样品时间延迟期CTCs高水平，表明ED-SCLC,病人的之中位CTCs个数为9.5个f 7.5ml屑，而LD-SCLC仅为1个／7.51111屑，再进一步显然ED-SCLC病人的CTCs高水平高于LD-SCLC病人。

（二）CTCs检验SCLC的及高血压

CTCs确实可作为检验SCLC和高血压的有救指f,叉人类学家们仍然在探讨的缺陷。Houi等在2009年通过CellSearch依此样品了50事例SCLC病人(LD-SCLC20事例，ED-SCLC30事例)的CTCs，推测CTCs>300个/7.5ml屑的病人及CTCs

时间延迟期CTCs>=50和

在该深入研究之中SCLC病人的高血压概括参数游戏内8个/7.5ml屑，以此将病人分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年某种程度应用CellSearch依此样品59事例SCLC病人在时间延迟期、1时间尺度肌肉注射后及4时间尺度肌肉注射终止后外固屑CTCs高水平，其之中ED-SCLC病人38事例，LD-SCLC病人2 1事例c时间延迟期有43事例病人(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml屑，CTCs>215个/7.5ml屑和CTCs

经过1时间尺度肌肉注射后病人CTCs高水平有所提高，且1时间尺度肌肉注射后CTCs

人类学家推断CTCs高水平是SCLC高血压的独立影响遗传物质，其之中1时间尺度肌肉注射后CTCs高水平是SCLC和高血压最强的计算遗传物质。

2013年ASCO发表的ECOG1508深入研究之中，人类学家尝试在155事例ED-SCLC之中加入载体病人，并对其之中123事例病人时间延迟期CTCs顺利进行样品，表明载体病人未能延至ED-SCLC病人的PFS和OS，但推测时间延迟期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml屑的mPFS都为4.4和4.3个月末（P=0.07），OS都为10.7和7.2个月末(P=0.01)。人类学家看来虽然载体病人没能提高ED-SCLC病人的PFS和OS，但却推测了CTCs可能是SCLC病人的高血压标志物。

早先，Igawa等尝试应用OBP-401飞行测试样品SCLC病人外周屑CTCso应用OBP-401飞行测试样品乳白血病和胃癌病人CTCs的具体深入研究已有后期美联社。深入研究划入30事例韧治的SCLC病人，29事例病人(96%)外周屑CTCs阳官能。在时间延迟期，21事例病人CTCs

（三）CTCs受控SCLC的住院和重新分配

现有的深入研究表明通过样品CTCs的显现出来受控SCLC的住院和重新分配较强极其重要的药理学含意o Tanaka等深入研究推测CTCs高水平‘j 125事例心脏病病人（还包括9事例SCLC病人）进展突出具体，比如说是与周围重新分配亲密（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，编者看来CTCs可作为受控心脏病周围重新分配的生物学标记物。Natio等深入研究推测SCLC在时间延迟期、病人终止后及住院后CTCs的阳官能率都为68.6%、26.5%和67.6，查看SCLC住院后外周学CTCs高水平升高，遭遇周围重新分配脏器的比率为0、1和>=2的病人其之中位CTCs个数都为2.0、7.5和21个/7.5ml屑,查看CTCs高水平与周围重新分配脏器的比率有关，周围重新分配越多，CTCs个数越高（p

三、CTCs在SCLC药理学应用之中的探险方向

住院和重新分配是随之而来病人病人失败和死亡的主要状况，及时推测的住院和重新分配并采敢积极有效的病人措施可相当大提高病人生存率。然而，由于SCLC依赖能够受控住院和重新分配的生物学标志物，且常规影像学检查难以推测纤重新分配灶及纤小残留病灶，随之而来遭遇住院和重新分配的SCLC病人不能及时接受确诊和病人。

药理学之中外LD-SCLC的病人高血压关联较大，查看有些之外期的病人在确诊时可能已遭遇了影像学不能推测的纤重新分配而成潜在的相当多期病人。通过样品外周屑CTCs的显现出及比率波动从而对SCLC病人体内状态顺利进行实时、动态地受控和评价，及时推测的住院、重新分配，将有助于药理学护士对病人适时的把握和病人策略的考虑，但究竟CTCs的比率或波动参数为多少时能够精确揭示SCLC的住院或重新分配由此可知不明确，须要要非常多的循证外科证据应予支持。

CTCs在检验SCLC病人病人各个方面的应用由此可知西北面探险阶段，病人每一次之中CTCs比率的波动与SCLC病人肌肉注射的依赖官能及其与SCLC病人放疗适时的考虑等缺陷在未来须要大量的药理学深入研究。近5年，对CTCs确实可作为SCLC病人高血压指标的深入研究逐渐增多，但SCLC最佳的高血压CTCs概括参数由此可知无确知，争议少有。

其之中3项来自Hou、Naito、Hiltermann的深入研究将SCLC的高血压CTCs佢恒定分别游戏内为50、8和2个／7.5ml屑，关联非常大，这可能与深入研究采行的统计学方依此有不尽相同以及入组样本量较少有关。同类型意大利人类学家Normanno等观点将ED-SCLC和LD-SCLC病人分开深入研究，对时间延迟期、l时间尺度肌肉注射后CTCs以及病人前后CTCs的波动参数分别游戏内高血压概括参数，为未来的深入研究缺少了新的思路。因由所在的科研人员工作团队也正致力于必先SCLC病人高血压最佳CTCs概括参数的深入研究，结果令人期望。

的个体化病人是病人方式的其发展方向。SCLC病人对肌肉注射口服的反应存在突出的共通点，其主要状况可能与复杂的异质官能、基因组表达关联及多态官能有关。所以，逐步明晰SCLC的真核生物学特点对实现真正含意上的SCLC个体化病人尤为极其重要。同类型必先人类学家王洁等深入研究人员通过应用单细胞核基因组测序手段对病人单个CTC顺利进行全真核生物、外显子真核生物测序。

在此项深入研究之中，谢晓亮任教申请专利的多重硫化和加成反向的扩增新科技产业(MAIBAC)，尝试实现了对病人外周屑单个CTC的全真核生物扩增和剖面测序，在单个细胞核高水平探测全真核生物基因组拷贝数变异(CNVs)和单蛋白质变异(SNVs)o单细胞核高水平CTCs真核生物测序新科技产业可及时缺少如耐药基因组突变等个体化病人所须要的极其重要信息，同时也为未来SCLC载体口服的整合缺少新科技产业支持。

SCLC组织骨头难以获取，限制了后续各项检查深入研究的开展，而并用CTCs构建的SCLC反向细胞核Dreamcast瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，有望应付这一迫切难题。早先，Hodgkinson等尝试将6事例ED-SCLC病人lOml外周屑之中的CTCs提取后注射到狂犬病血清腹膜，结果在4只血清身上过渡到了CDXs，显然SCLC病人的CTCs较强致瘤官能。

同时应用CelISearch依此样品这6事例SCLC病人的CTCs，表明尝试过渡到CDXs的4事例病人的CTCs个数均>400个／7.5ml屑，而另外2事例未过渡到CDXs的病人其CTCs个数都为222和20个／7.5ml屑，查看SCLC的CTCs致瘤官能与外周屑CTCs教量有关。再进一步分析推测相较于肌肉注射敏感官能SCLC，肌肉注射耐药官能SCLC病人的CDXs倍增时间短、生长非常不断。对3事例CDXs给予顺铂和依托泊苷肌肉注射口服，其敏感官能顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病人的OS都为9.7.3.5.0.9个月末，查看对CDXs顺利进行体外药敏飞行测试可以间接反应病人生存时间。

该深入研究显示外SCLC的外周屑CTCs较强干细胞核特官能，可顺利进行体外培养出来、过渡到与原发高度相近的CDXs，为SCLC病人的体外药敏飞行测试、耐药的系统分析等一系列检查深入研究缺少了足量的组织，应付了SCLC病人骨头来源太低的缺陷。

结论

从现行的深入研究可以显露，虽然CTCs在SCLC之中的药理学应用仍西北面探险阶段，但前景广阔。现今，诸多转化官能深入研究正在顺利进行之中，看来随着深入研究的不断深入，CTCs有望成SCLC的突破口，期望CTCs在SCLC的应用之中为我们带来欢笑。

主笔： 雪